1. Tilgangur: Þessi aðferð miðar að því að veita stöðlaða aðferð við smitgátaraðgerðir og verndun sótthreinsaðra herbergja.
2. Gildissvið: líffræðileg prófunarstofa
3. Ábyrgðaraðili: Gæðaeftirlitsmaður
4. Skilgreining: Engin
5. Öryggisráðstafanir
Framkvæmið stranglega smitgát til að koma í veg fyrir örverumengun; notendur ættu að slökkva á útfjólubláa lampanum áður en þeir fara inn í sótthreinsað herbergi.
6. Aðferðir
6.1. Sótthreinsað herbergi ætti að vera útbúið með sótthreinsuðum aðgerðarsal og biðrými. Hreinlæti sótthreinsaðs aðgerðarsalsins ætti að ná flokki 10000. Hitastig innandyra ætti að vera haldið á milli 20-24°C og rakastigið ætti að vera haldið á milli 45-60%. Hreinlæti á hreinum bekk ætti að ná flokki 100.
6.2. Sótthreinsað herbergi skal haldið hreinu og það er stranglega bannað að hrúga saman rusli til að koma í veg fyrir mengun.
6.3. Komið í veg fyrir mengun allra sótthreinsunarbúnaða og ræktunarmiðla. Þeir sem eru mengaðir ættu að hætta notkun þeirra.
6.4. Sótthreinsað herbergi ætti að vera búið sótthreinsiefnum í virkri styrk, svo sem 5% kresóllausn, 70% alkóhóllausn, 0,1% klórmetíónínlausn o.s.frv.
6.5. Sótthreinsað herbergi skal reglulega sótthreinsa og þrífa með viðeigandi sótthreinsiefni til að tryggja að hreinleiki þess uppfylli kröfur.
6.6. Öll tæki, áhöld, diskar og aðrir hlutir sem þarf að koma með inn í sótthreinsað herbergi skulu vera vel pakkaðir og sótthreinsaðir með viðeigandi aðferðum.
6.7. Áður en starfsfólk fer inn í sótthreinsað herbergi skal það þvo hendur sínar með sápu eða sótthreinsandi efni og síðan skipta um föt, skó, húfur, grímur og hanska í sótthreinsuðu herbergi (eða þurrka hendurnar aftur með 70% etanóli) áður en farið er inn í sótthreinsað herbergi. Framkvæma aðgerðir í bakteríuklefa.
6.8. Áður en sótthreinsað herbergi er notað verður að kveikja á útfjólubláa lampanum í því í meira en 30 mínútur til að framkvæma geislun og sótthreinsun og einnig á hreinsuðubekknum til að blása lofti. Eftir að aðgerðinni er lokið skal þrífa sótthreinsað herbergið tímanlega og sótthreinsa það síðan með útfjólubláu ljósi í 20 mínútur.
6.9. Fyrir skoðun skal halda ytri umbúðum prófunarsýnisins óskemmdum og má ekki opna þær til að koma í veg fyrir mengun. Fyrir skoðun skal nota bómullarhnoðra með 70% alkóhóli til að sótthreinsa ytra yfirborðið.
6.10. Í hverri aðgerð skal framkvæma neikvæða samanburðarprófun til að kanna áreiðanleika smitgátaraðgerðarinnar.
6.11. Þegar bakteríuvökvi er sogaður inn verður að nota sogkúlu til að taka hann upp. Ekki snerta rörið beint með munninum.
6.12. Sótthreinsa þarf bólusetningarnálina með loga fyrir og eftir hverja notkun. Eftir kælingu má bólusetja ræktina.
6.13. Rör, tilraunaglös, petriskálar og önnur áhöld sem innihalda bakteríuvökva ættu að vera látin liggja í bleyti í sótthreinsunarfötu sem inniheldur 5% lysóllausn til sótthreinsunar og tekin út og skoluð eftir 24 klukkustundir.
6.14. Ef bakteríuvökvi hellist á borð eða gólf, skal strax hella 5% karbólínsýrulausn eða 3% lysóli á mengaða svæðið í að minnsta kosti 30 mínútur áður en það er meðhöndlað. Þegar vinnuföt og húfur mengast af bakteríuvökva skal taka þau af strax og þvo þau eftir háþrýstigufusótthreinsun.
6.15. Öllum hlutum sem innihalda lifandi bakteríur verður að sótthreinsa áður en þeim er skolað undir krananum. Það er stranglega bannað að menga frárennsliskerfið.
6.16. Fjöldi nýlendna í sótthreinsuðu rými ætti að vera athugaður mánaðarlega. Með hreinan bekk opinn skal taka nokkrar sótthreinsaðar petriskálar með innra þvermál 90 mm og sprauta með smitgát um 15 ml af næringaragarræktunarmiðli sem hefur verið bræddur og kældur niður í um 45°C. Eftir að efnið hefur storknað skal setja það á hvolf við 30 til 35°C hita og rækta í 48 klukkustundir í ræktunarofni. Eftir að sótthreinsun hefur verið staðfest skal taka 3 til 5 plötur og setja þær vinstra megin, í miðjunni og hægra megin við vinnustaðinn. Eftir að lokið hefur verið opnað og þær hafa verið látnar standa í 30 mínútur skal setja þær á hvolf í ræktunarofni við 30 til 35°C hita í 48 klukkustundir og taka þær út. Skoða. Meðalfjöldi ýmissa baktería á plötunni í hreinu svæði af flokki 100 skal ekki fara yfir 1 nýlenda og meðalfjöldi í hreinu herbergi af flokki 10000 skal ekki fara yfir 3 nýlendur. Ef farið er yfir mörkin skal sótthreinsa sótthreinsaða herbergið vandlega þar til endurteknar skoðanir uppfylla kröfur.
7. Vísað er til kaflans (Aðferð við sótthreinsunarskoðun) í „Aðferðir við skoðun lyfja“ og „Staðlaðar starfsvenjur kínverskra lyfjaeftirlitsaðila“.
8. Dreifingardeild: Gæðastjórnunardeild
Tæknilegar leiðbeiningar um hrein herbergi:
Eftir að hafa fengið dauðhreinsað umhverfi og dauðhreinsuð efni verðum við að viðhalda dauðhreinsuðu ástandi til að rannsaka tiltekna þekkta örveru eða nýta virkni hennar. Annars geta ýmsar örverur að utan auðveldlega blandast inn. Fyrirbærið þar sem óviðkomandi örverur að utan blandast saman er kallað mengandi bakteríur í örverufræði. Að koma í veg fyrir mengun er mikilvæg tækni í örverufræðivinnu. Algjör dauðhreinsun annars vegar og að koma í veg fyrir mengun hins vegar eru tveir þættir smitgátartækni. Að auki verðum við að koma í veg fyrir að örverurnar sem verið er að rannsaka, sérstaklega sjúkdómsvaldandi örverur eða erfðabreyttar örverur sem eru ekki til í náttúrunni, sleppi úr tilraunaílátum okkar út í ytra umhverfi. Í þessum tilgangi eru margar ráðstafanir í örverufræði.
Sótthreinsað herbergi er venjulega lítið herbergi sem er sérstaklega innréttað í örverufræðirannsóknarstofu. Hægt er að byggja það úr plötum og gleri. Svæðið ætti ekki að vera of stórt, um 4-5 fermetrar, og hæðin ætti að vera um 2,5 metrar. Setja ætti upp geymslurými fyrir utan sótthreinsað herbergið. Hurð geymslurýmisins og hurð sótthreinsaðs herbergisins ættu ekki að snúa í sömu átt til að koma í veg fyrir að loftstreymi beri með sér ýmsar bakteríur. Bæði sótthreinsað herbergið og geymslurýmið verða að vera loftþétt. Loftræstibúnaður innanhúss verður að vera með loftsíunarbúnaði. Gólf og veggir sótthreinsaðs herbergisins verða að vera slétt, auðvelt að bera óhreinindi í og auðvelt að þrífa. Vinnuflöturinn ætti að vera sléttur. Bæði sótthreinsað herbergið og geymslurýmið eru búin útfjólubláum ljósum. Útfjólubláu ljósin í sótthreinsað herberginu eru í 1 metra fjarlægð frá vinnufleti. Starfsfólk sem kemur inn í sótthreinsað herbergið ætti að vera í sótthreinsuðum fötum og húfum.
Sem stendur eru sótthreinsuð herbergi aðallega til staðar í örverufræðiverksmiðjum, en almennar rannsóknarstofur nota hreina vinnubekki. Helsta hlutverk hreina vinnubekksins er að nota loftflæðistæki til að fjarlægja ýmis smátt ryk, þar á meðal örverur, af vinnufleti. Rafmagnstækið leyfir lofti að fara í gegnum HEPA-síu og síðan inn á vinnuflötinn, þannig að vinnuflöturinn er alltaf undir stjórn sótthreinsaðs lofts. Þar að auki er hraðvirkt lofttjald á hliðinni nálægt ytra byrði til að koma í veg fyrir að bakteríuloft komist inn.
Á erfiðum stöðum er einnig hægt að nota dauðhreinsibox úr tré í stað hreins bekkjar. Kassinn er einfaldur í uppbyggingu og auðvelt er að færa hann. Það eru tvö göt á framhlið kassans sem eru lokuð með ýtingarhurðum þegar hann er ekki í notkun. Hægt er að rétta út hendurnar inn á meðan hann er í notkun. Efri hluti framhliðarinnar er úr gleri til að auðvelda notkun innandyra. Inni í kassanum er útfjólublátt ljós og hægt er að setja áhöld og bakteríur inn um litla hurð á hliðinni.
Sótthreinsandi aðferðir gegna nú ekki aðeins lykilhlutverki í örverufræðilegum rannsóknum og notkun, heldur eru þær einnig mikið notaðar í mörgum líftæknigreinum. Til dæmis erfðafræðilegri tækni, einstofna mótefnatækni o.s.frv.
Birtingartími: 6. mars 2024