Það eru tvær meginuppsprettur mengunar í hreinherbergi: agnir og örverur, sem geta stafað af mönnum og umhverfisþáttum, eða skyldri starfsemi í ferlinu. Þrátt fyrir bestu viðleitni mun mengun enn komast inn í hreint herbergi. Sérstakir algengir mengunarberar eru mannslíkamar (frumur, hár), umhverfisþættir eins og ryk, reykur, mistur eða búnaður (rannsóknarstofubúnaður, hreinsibúnaður) og óviðeigandi þurrkutækni og hreinsunaraðferðir.
Algengasta mengunarberinn er fólk. Jafnvel með ströngustu fatnaði og ströngustu verklagsreglum, eru óviðeigandi þjálfaðir rekstraraðilar stærsta ógnin af mengun í hreinum herbergjum. Starfsmenn sem fara ekki eftir leiðbeiningum um hreinherbergi eru áhættuþáttur. Svo lengi sem einn starfsmaður gerir mistök eða gleymir skrefi mun það leiða til mengunar á öllu hreinu herberginu. Fyrirtækið getur aðeins tryggt hreinleika hreinherbergisins með stöðugu eftirliti og stöðugri uppfærslu þjálfunar með núllmengun.
Aðrir helstu uppsprettur mengunar eru verkfæri og tæki. Ef kerra eða vél er aðeins þurrkuð í grófum dráttum áður en farið er inn í hreint herbergi getur það borið inn örverur. Oft eru starfsmenn ekki meðvitaðir um að búnaður á hjólum velti yfir mengað yfirborð þegar því er ýtt inn í hreinherbergið. Yfirborð (þar á meðal gólf, veggir, búnaður o.s.frv.) eru reglulega prófaðir með tilliti til lífvænlegra talna með því að nota sérhannaðar snertiplötur sem innihalda vaxtarefni eins og Trypticase Soy Agar (TSA) og Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA er vaxtarmiðill hannaður fyrir bakteríur og SDA er vaxtarmiðill hannaður fyrir myglu og ger. TSA og SDA eru venjulega ræktuð við mismunandi hitastig, þar sem TSA verður fyrir hitastigi á bilinu 30-35˚C, sem er ákjósanlegur vaxtarhiti fyrir flestar bakteríur. 20-25˚C hitastigið er ákjósanlegt fyrir flestar myglu- og gertegundir.
Loftflæði var einu sinni algeng orsök mengunar, en loftræstikerfi í dag hafa nánast útrýmt loftmengun. Loftinu í hreinu herbergi er stjórnað og fylgst reglulega með (td daglega, vikulega, ársfjórðungslega) með tilliti til agnafjölda, lífvænlegra talna, hitastigs og raka. HEPA síur eru notaðar til að stjórna agnafjölda í loftinu og hafa getu til að sía út agnir niður í 0,2µm. Þessum síum er venjulega haldið í gangi stöðugt með kvarðaðri flæðishraða til að viðhalda loftgæðum í herberginu. Rakastigi er venjulega haldið í lágmarki til að koma í veg fyrir útbreiðslu örvera eins og baktería og myglu sem kjósa rakt umhverfi.
Reyndar er hæsta stig og algengasta uppspretta mengunar í hreinu herbergi rekstraraðilinn.
Upptök og aðkomuleiðir mengunar eru ekki verulega mismunandi eftir atvinnugreinum, en munur er á milli atvinnugreina hvað varðar þolanlegt og óþolandi magn mengunar. Til dæmis þurfa framleiðendur neyslutaflna ekki að viðhalda sama hreinleikastigi og framleiðendur sprautuefna sem eru beint inn í mannslíkamann.
Lyfjaframleiðendur hafa minna þol fyrir örverumengun en hátækni rafeindaframleiðendur. Framleiðendur hálfleiðara sem framleiða smásjárvörur geta ekki samþykkt neina agnamengun til að tryggja virkni vörunnar. Þess vegna hafa þessi fyrirtæki aðeins áhyggjur af ófrjósemi vörunnar sem á að græða í mannslíkamann og virkni flísarinnar eða farsímans. Þeir hafa tiltölulega minni áhyggjur af myglu, sveppum eða annars konar örverumengun í hreinu herbergi. Á hinn bóginn hafa lyfjafyrirtæki áhyggjur af öllum lifandi og dauðum uppsprettum mengunar.
Lyfjaiðnaðurinn er undir stjórn FDA og verður að fylgja reglum um góða framleiðsluhætti (GMP) vegna þess að afleiðingar mengunar í lyfjaiðnaði eru mjög skaðlegar. Lyfjaframleiðendur þurfa ekki aðeins að tryggja að vörur þeirra séu lausar við bakteríur, þeir þurfa einnig að hafa skjöl og rekja allt. Hátæknibúnaðarfyrirtæki getur sent fartölvu eða sjónvarp svo framarlega sem það stenst innri endurskoðun sína. En það er ekki svo einfalt fyrir lyfjaiðnaðinn, þess vegna er mikilvægt fyrir fyrirtæki að hafa, nota og skrá verklagsreglur fyrir hreinherbergi. Vegna kostnaðarsjónarmiða ráða mörg fyrirtæki utanaðkomandi faglega ræstingarþjónustu til að sinna ræstingaþjónustu.
Alhliða umhverfisprófunaráætlun fyrir hrein herbergi ætti að innihalda sýnilegar og ósýnilegar loftbornar agnir. Þó að það sé engin krafa um að öll aðskotaefni í þessu stýrðu umhverfi séu auðkennd af örverum. Umhverfiseftirlitsáætlunin ætti að innihalda viðeigandi stig bakteríuauðkenningar við sýnistökur. Það eru margar aðferðir til að bera kennsl á bakteríur eins og er.
Fyrsta skrefið í auðkenningu baktería, sérstaklega þegar kemur að einangrun hreinherbergja, er Gram-litunaraðferðin, þar sem hún getur gefið túlkandi vísbendingar um uppruna örverumengunar. Ef örverueinangrunin og auðkenningin sýnir Gram-jákvæða kokka gæti mengunin verið frá mönnum. Ef örverueinangrunin og auðkenningin sýnir Gram-jákvæðar stangir getur mengunin komið frá ryki eða sótthreinsandi ónæmum stofnum. Ef örverueinangrunin og auðkenningin sýnir Gram-neikvæðar stangir, gæti uppspretta mengunarinnar komið frá vatni eða hvaða blautu yfirborði sem er.
Örveruauðkenning í lyfjafræðilegu hreinherbergi er mjög nauðsynleg vegna þess að það tengist mörgum þáttum gæðatryggingar, svo sem lífgreiningar í framleiðsluumhverfi; bakteríuauðkenningarprófun á lokaafurðum; ónefndar lífverur í dauðhreinsuðum vörum og vatni; gæðaeftirlit með gerjunargeymslutækni í líftækniiðnaði; og sannprófun á örveruprófum meðan á löggildingu stendur. Aðferð FDA til að staðfesta að bakteríur geti lifað af í ákveðnu umhverfi verður æ algengari. Þegar örverumengun fer yfir tilgreindu magni eða dauðhreinsunarprófunarniðurstöður benda til mengunar er nauðsynlegt að sannreyna virkni hreinsi- og sótthreinsunarefna og koma í veg fyrir auðkenningu á mengunarupptökum.
Það eru tvær aðferðir til að fylgjast með umhverfisyfirborði hreinsherbergja:
1. Snertiplötur
Þessir sérstöku ræktunarréttir innihalda dauðhreinsaðan vaxtarmiðil, sem er útbúinn til að vera hærri en brún réttarins. Snertiplötuhlífin hylur yfirborðið sem á að taka sýni og allar örverur sem sjást á yfirborðinu munu loðast við agaryfirborðið og ræktast. Þessi tækni getur sýnt fjölda örvera sem sjást á yfirborði.
2. Þurrkunaraðferð
Þetta er dauðhreinsað og geymt í viðeigandi sæfðum vökva. Strokið er borið á prófunarflötinn og örveran er auðkennd með því að endurheimta strokið í miðlinum. Þurrkur eru oft notaðir á ójöfnu yfirborði eða á svæðum sem erfitt er að taka sýni úr með snertiplötu. Sýnataka úr þurrku er meira eigindlegt próf.
Birtingartími: 21. október 2024