Tvær helstu uppsprettur mengunar í hreinrýmum eru: agnir og örverur, sem geta stafað af þáttum manna og umhverfis, eða tengdri starfsemi í ferlinu. Þrátt fyrir ítrustu viðleitni mun mengun samt sem áður komast inn í hreinrýmin. Algengir mengunarberar eru meðal annars mannslíkaminn (frumur, hár), umhverfisþættir eins og ryk, reykur, mistur eða búnaður (rannsóknarstofubúnaður, hreinsibúnaður) og óviðeigandi þurrkatækni og þrifaðferðir.
Algengasta mengunarberinn er fólk. Jafnvel með ströngustu klæðnaði og ströngustu verklagsreglum eru ófullnægjandi þjálfaðir starfsmenn mesta mengunarógn í hreinrýmum. Starfsmenn sem fylgja ekki leiðbeiningum um hreinrými eru áhættuþáttur. Svo lengi sem einn starfsmaður gerir mistök eða gleymir skrefi mun það leiða til mengunar í öllu hreinrýminu. Fyrirtækið getur aðeins tryggt hreinlæti hreinrýmisins með stöðugu eftirliti og stöðugri uppfærslu á þjálfun með núll mengunartíðni.
Aðrar helstu uppsprettur mengunar eru verkfæri og búnaður. Ef vagn eða vél er aðeins gróflega þurrkuð áður en hún er sett inn í hreinrýmið getur hún borið með sér örverur. Oft eru starfsmenn ekki meðvitaðir um að hjólabúnaður rúllar yfir mengaða fleti þegar honum er ýtt inn í hreinrýmið. Yfirborð (þar á meðal gólf, veggir, búnaður o.s.frv.) eru reglulega prófuð fyrir lífvænleg örverufjölda með því að nota sérhönnuð snertiplötur sem innihalda vaxtarefni eins og Trypticase Soy Agar (TSA) og Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA er vaxtarefni hannað fyrir bakteríur og SDA er vaxtarefni hannað fyrir myglu og ger. TSA og SDA eru venjulega ræktuð við mismunandi hitastig, þar sem TSA er útsett fyrir hitastigi á bilinu 30-35˚C, sem er kjörhitastig fyrir flestar bakteríur. 20-25˚C sviðið er kjörhitastig fyrir flestar myglu- og gersveppitegundir.
Loftflæði var áður algeng orsök mengunar, en nútíma hreinrýmakerfi (HVAC) hafa nánast útrýmt loftmengun. Loftið í hreinrýmum er stjórnað og fylgst reglulega með (t.d. daglega, vikulega, ársfjórðungslega) hvað varðar agnatölu, lífvænleika, hitastig og rakastig. HEPA-síur eru notaðar til að stjórna agnatölu í loftinu og geta síað út agnir allt niður í 0,2µm. Þessar síur eru venjulega haldnar stöðugt í gangi með kvörðuðu rennslishraða til að viðhalda loftgæðum í herberginu. Rakastig er venjulega haldið lágu til að koma í veg fyrir fjölgun örvera eins og baktería og myglu sem kjósa rakt umhverfi.
Reyndar er rekstraraðilinn sá sem veldur hæsta stigi og algengasta mengunar í hreinrýmum.
Uppsprettur og leiðir mengunar eru ekki mjög mismunandi eftir atvinnugreinum, en það er munur á milli atvinnugreina hvað varðar þolanlegt og óþolanlegt mengunarstig. Til dæmis þurfa framleiðendur inntökutöflna ekki að viðhalda sama hreinlætisstigi og framleiðendur stungulyfja sem eru sett beint inn í mannslíkamann.
Lyfjaframleiðendur hafa minni þol gegn örverumengun en framleiðendur hátæknirafeinda. Hálfleiðaraframleiðendur sem framleiða örsmáar vörur geta ekki sætt sig við neina agnamengun til að tryggja virkni vörunnar. Þess vegna hafa þessi fyrirtæki aðeins áhyggjur af sótthreinsun vörunnar sem á að græða í mannslíkamann og virkni örgjörvans eða farsímans. Þau hafa tiltölulega minni áhyggjur af myglu, sveppum eða öðrum gerðum örverumengun í hreinum rýmum. Lyfjafyrirtæki hafa hins vegar áhyggjur af öllum lifandi og dauðum mengunargjöfum.
Lyfjaiðnaðurinn er undir eftirliti Matvæla- og lyfjaeftirlitsins (FDA) og verður að fylgja ströngum reglum um góða framleiðsluhætti (GMP) því afleiðingar mengunar í lyfjaiðnaðinum eru mjög skaðlegar. Lyfjaframleiðendur þurfa ekki aðeins að tryggja að vörur þeirra séu lausar við bakteríur, heldur eru þeir einnig skyldugir til að hafa skjöl og rekja allt. Fyrirtæki sem framleiðir hátæknibúnað getur sent fartölvur eða sjónvarp svo framarlega sem það stenst innri endurskoðun. En það er ekki svo einfalt fyrir lyfjaiðnaðinn, og þess vegna er mikilvægt fyrir fyrirtæki að hafa, nota og skjalfesta verklagsreglur í hreinrýmum. Vegna kostnaðaráhrifa ráða mörg fyrirtæki utanaðkomandi fagmenn til að framkvæma þrif.
Ítarlegt umhverfisprófunarforrit fyrir hreinrými ætti að innihalda sýnilegar og ósýnilegar loftbornar agnir. Þó er engin krafa um að öll mengunarefni í þessu stýrða umhverfi séu greind með örverum, ætti umhverfiseftirlitsforritið að innihalda viðeigandi stig bakteríugreiningar í sýnishornum. Margar aðferðir til að bera kennsl á bakteríur eru í boði nú þegar.
Fyrsta skrefið í bakteríugreiningu, sérstaklega þegar kemur að einangrun í hreinrýmum, er Gram-litunaraðferðin, þar sem hún getur gefið vísbendingar um uppruna örverumengunarinnar. Ef örverueinangrun og greining sýnir Gram-jákvæða kokka gæti mengunin verið frá mönnum. Ef örverueinangrun og greining sýnir Gram-jákvæða stafi gæti mengunin verið frá ryki eða sótthreinsiefnisþolnum stofnum. Ef örverueinangrun og greining sýnir Gram-neikvæðar stafi gæti uppspretta mengunarinnar verið frá vatni eða hvaða blautu yfirborði sem er.
Örverugreining í hreinrýmum lyfjafyrirtækja er mjög nauðsynleg því hún tengist mörgum þáttum gæðatryggingar, svo sem lífprófum í framleiðsluumhverfi; bakteríugreiningu á lokaafurðum; ónefndum lífverum í dauðhreinsuðum vörum og vatni; gæðaeftirliti með gerjunargeymslutækni í líftækniiðnaði; og staðfestingu örveruprófa við löggildingu. Aðferð Matvæla- og lyfjaeftirlitsins (FDA) til að staðfesta að bakteríur geti lifað af í tilteknu umhverfi mun verða sífellt algengari. Þegar örverumengun fer yfir tilgreint magn eða niðurstöður dauðhreinsiprófa benda til mengunar er nauðsynlegt að staðfesta virkni hreinsiefna og sótthreinsunarefna og útrýma því að bera kennsl á mengunaruppsprettur.
Það eru tvær aðferðir til að fylgjast með umhverfisflötum í hreinum rýmum:
1. Snertiplötur
Þessar sérstöku ræktunarskálar innihalda dauðhreinsað vaxtarmiðil, sem er útbúið þannig að hann sé hærra en brún skálarinnar. Lok snertiplötunnar hylur yfirborðið sem á að taka sýni af og allar örverur sem sjást á yfirborðinu festast við agaryfirborðið og rækta. Þessi tækni getur sýnt fjölda örvera sem sjást á yfirborði.
2. Strykjuaðferð
Þetta er dauðhreinsað og geymt í hentugum dauðhreinsuðum vökva. Sýnið er sett á prófunaryfirborðið og örveran er greind með því að endurheimta það í miðlinum. Sýni eru oft notuð á ójöfnum fleti eða á svæðum þar sem erfitt er að taka sýni með snertiplötu. Sýnataka með sýni er frekar eigindleg prófun.
Birtingartími: 21. október 2024